ایجاد سازواره ژنی گلوکاناز باکتری باسیلوس سوبتیلیس در اشریشیا کلی

سابقه و هدف: غلات به عنوان تغذیه اصلی طیور مطرح می باشد. غلات دارای میزان قابل توجهی پلی ساکارید غیرنشاسته ای (nsp) محلول می باشند. nsp منجر به افزایش اثرات منفی و ناسازگاری در طیور می شوند. مکمل آنزیمی بتاگلوکاناز با تجزیه پلی ساکاریدهای غیرنشاسته ای ویسکوزیته محتویات هضمی دستگاه گوارش را کاهش می دهد و جذب روده ای را بالا می برد. این مطالعه با هدف ایجاد سازواره ژنی گلوکاناز باکتری باسیلوس سوبتیلیس در باکتری اشریشیا کلی انجام شد. مواد و روش ها: در این مطالعه تجربی، با استفاده از پرایمرهای اختصاصی و روش واکنش زنجیره ای پلی مراز توالی کامل ژن گلوکاناز از باکتری باسیلوس سوبتیلیس تکثیر شد. پس از خالص سازی، ژن bgl با استفاده از روش t/a cloning در وکتور pgem کلون گردید. سپس ساختار پلاسمیدی pgem-bgls در باکتری اشریشیا کلی سویه top-10 ترانسفورم شد. باکتری ترانسفورم شده به محیط جامد lb محتوی آمپی سیلین (100 میکروگرم در هر میلی لیتر) منتقل شد. پلاسمید نوترکیب ترانسفورم شده در اشریشیا کلی سویه top-10 و کلنی های حاوی پلاسمید به روش pcr انتخاب شد. تایید نهایی سازواره حاصل به روش هضم آنزیمی صورت گرفت. یافته ها: نتایج نشان داد که همسانه سازی ژن گلوکاناز در باکتری اشریشیا کلی به درستی صورت گرفته است. واکنش زنجیره ای پلی مراز همسانه سازی ژن 767 جفت بازی گلوکاناز را تایید نمود. نتیجه گیری: این پژوهش با ساخت سازواره ژنی گلوکاناز از باکتری باسیلوس سوبتیلیس و کلون کردن آن در باکتری اشریشیا کلی می تواند کاندیدای جدیدی در تولید پروبیوتیک برای دام و طیور معرفی نماید.